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關(guān)于病原微生物檢測(cè)你有什么想了解的呢?

更新時(shí)間:2022-09-26      點(diǎn)擊次數(shù):993
  
  近年來發(fā)展起來的在微生物檢測(cè)領(lǐng)域中一種新技術(shù)。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯(lián)到磁珠微球上,通過抗原抗體反應(yīng)形成磁珠一目標(biāo)病原體復(fù)合物或磁珠一一抗一目標(biāo)病原體復(fù)合物,在外部磁場(chǎng)磁力的作用下,將目標(biāo)病原體分離出來。目前已經(jīng)開發(fā)出了針對(duì)各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團(tuán)菌等,廣泛應(yīng)用到各級(jí)科研和實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間縮短至4h。IM—Bs還可以和其它檢測(cè)技術(shù)聯(lián)合來檢測(cè)病原菌,免疫磁珠分離得到的目標(biāo)菌可繼續(xù)用于分離培養(yǎng)使大腸埃希菌0157低檢測(cè)限由200cfu·g提高到2cfu·g~;IMBS結(jié)合聚合酶鏈反應(yīng)(IMBS—PCR)可對(duì)培養(yǎng)條件比較特殊的細(xì)菌如苛養(yǎng)菌、厭氧菌進(jìn)行快速檢測(cè),肉類中的產(chǎn)毒素型產(chǎn)氣莢膜梭菌經(jīng)IMBS.PCR檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間縮短到10h,低檢測(cè)限可達(dá)10cfu·g~,有研究者利用IMBS結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測(cè)出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒,檢測(cè)時(shí)間大大縮短;Leon—Velarde等利用IMB8結(jié)合酶聯(lián)檢測(cè),大大提高了沙門菌的檢測(cè)效率。
  病原微生物是指可以侵人體,在宿主中生長(zhǎng)繁殖、釋放毒性物質(zhì)等引起機(jī)體不同程度病理變化、發(fā)生感染的微生物,包括細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲、衣原體、支原體等。病原微生物檢測(cè)并非新領(lǐng)域,基于病原學(xué)證據(jù)的抗感染一直都是臨床診療的'金標(biāo)準(zhǔn)'。如果能盡早識(shí)別致病病原、啟動(dòng)恰當(dāng)?shù)目垢腥痉桨缚筛纳苹颊哳A(yù)后,尤其是重癥感染者。病原微生物檢測(cè)在感染判定中意義重大,越來越多的檢測(cè)技術(shù)引入臨床,除了傳統(tǒng)的檢測(cè)方法如涂片染色、培養(yǎng)分離、免疫學(xué)技術(shù)、核酸檢測(cè)等,還有二代測(cè)序技術(shù)(Next-generationsequencing,NGS)等。
  病原微生物檢測(cè)的生物化學(xué)方法:
  原理:生化方法檢測(cè)病原微生物實(shí)際上是測(cè)測(cè)定微生物特異性酶。由于各種微生物所具有的系統(tǒng)不*相同,對(duì)許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來間接檢測(cè)該微生物內(nèi)酶的有無,從而達(dá)到檢測(cè)特定微生物的目的。
  辛酯酶法:快速檢測(cè)沙門氏菌。沙門氏茵能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸杄茵科細(xì)茵所不具備的。以4-甲基傘形酮辛酯ハUCAP)為底物,經(jīng)沙門氏菌的辛酯酶降解后,釋放出4-甲基傘形酮(MU),在紫外燈下觀察其發(fā)出的藍(lán)色熒光。
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